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《飼料中慶大霉素的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》征求意見

2023-12-25 09:40:56 來(lái)源：儀表網(wǎng) 閱讀量：10326

　　近日，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所、四川威爾檢測(cè)技術(shù)股份有限公司、通威股份有限公司等單位起草，TC76(全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì))歸口的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃《飼料中慶大霉素的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》征求意見稿已編制完成，現(xiàn)公開征求意見。

　　慶大霉素是廣譜抗生素，對(duì)葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、炭疸桿菌等革蘭氏陽(yáng)性菌和大腸桿菌、沙門氏菌、綠膿桿菌、巴氏桿菌等革蘭氏陰性菌均有良好抑殺作用，對(duì)結(jié)核桿菌的殺菌力也較強(qiáng)，是目前我國(guó)畜牧業(yè)和水產(chǎn)業(yè)中常用的獸藥之一，主要用于敏感菌引起的消化道、呼吸道、泌尿生殖系統(tǒng)感染及敗血癥等。對(duì)豬牛羊的治療，如肺炎、鼻炎等，可抑制引起呼吸道感染的細(xì)菌的生長(zhǎng)，減輕炎癥癥狀，并幫助恢復(fù)呼吸系統(tǒng)的正常功能，修復(fù)腸道功能，減輕腹瀉癥狀，并促進(jìn)消化道健康。

　　由于慶大霉素的毒性，飼料中添加的慶大霉素被動(dòng)物機(jī)體吸收，產(chǎn)生動(dòng)物蓄積，使人食用含有慶大霉素的動(dòng)物性食品后在人體內(nèi)產(chǎn)生耐藥性和一定的毒性。因此，飼料中慶大霉素的殘留和抗生素污染已成為國(guó)內(nèi)外的關(guān)注熱點(diǎn)之一。農(nóng)業(yè)部出臺(tái)了一系列公告禁止抗生素在飼料中的使用，并于2019年發(fā)布194號(hào)公告，規(guī)定自2020年起，飼料生產(chǎn)企業(yè)停止生產(chǎn)含有促生長(zhǎng)類藥物飼料添加劑的商品飼料，隨著抗生素在飼料中的禁用，慶大霉素也正式在飼料中禁用。然而慶大霉素在飼料中非法添加和外源污染問(wèn)題時(shí)有發(fā)生，對(duì)飼料工業(yè)發(fā)展、人類健康和環(huán)境安全帶來(lái)大量的負(fù)面影響。因此，制訂飼料中慶大霉素的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)具有重要意義。

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件起草單位：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所、四川威爾檢測(cè)技術(shù)股份有限公司、通威農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司。

　　本文件描述了飼料中慶大霉素的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。本文件適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補(bǔ)充料和添加劑預(yù)混合飼料中慶大霉素的測(cè)定。本文件慶大霉素的檢出限為50μg/kg，定量限為100μg/kg。

　　原理：

　　試樣中的慶大霉素用5%三氯乙酸溶液提取、混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定，基質(zhì)匹配曲線校準(zhǔn)，外標(biāo)法定量。

　　儀器設(shè)備：

　　1.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源(ESI)。

　　2.分析天平：精度為0.1mg 和0.01mg。

　　3.離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于8000r/min。

　　4.超聲波清洗儀。

　　5.固相萃取裝置。

　　6.氮吹儀。

　　樣品：

　　按照GB/T 20195規(guī)定制備試樣，至少200g，粉碎使其全部過(guò)0.425mm試驗(yàn)篩，混合均勻，裝入密閉容器中，備用。選取類型相同，均勻一致、且在待測(cè)物保留時(shí)間處，儀器響應(yīng)值小于方法定量限30%的飼料樣品，作為空白樣品。

　　液相色譜參考條件如下：

　　a)色譜柱：C18色譜柱，柱長(zhǎng)100mm，內(nèi)徑2.1mm，粒徑1.7μm，或性能相當(dāng)者；

　　b)柱溫：30 ℃；

　　c)流速：0.4mL/min；

　　d)進(jìn)樣量：5L；

　　e)流動(dòng)相：A 相為0.1%甲酸溶液(5.7)，B 相為 0.1%甲酸乙腈溶液(5.8)。

　　質(zhì)譜參考條件如下：

　　a) 電離方式：電噴霧電離，正離子模式(ESI+)；

　　b) 檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；

　　c) 霧化氣、干燥氣為高純氮?dú)?，碰撞氣為高純氬氣或其他合適氣體；

　　d) 噴霧電壓、碰撞能量等參數(shù)應(yīng)優(yōu)化至最優(yōu)靈敏度。

　　定量：

　　以基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中待測(cè)組分的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.99。試樣溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測(cè)物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)，如超出線性范圍，應(yīng)重新測(cè)定。單點(diǎn)校準(zhǔn)定量時(shí)，試樣溶液中待測(cè)組分質(zhì)量濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度相差不超過(guò)30%。

　　精密度：

　　在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對(duì)差值不大于該算術(shù)平均值的20%。

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