【適用范圍及性能】

　　玉米赤霉烯酮免疫親和柱適用于糧食及糧食制品、食品、飼料等樣本中的ZEN凈化處理，提高了樣品的純度，純化后的提取液可用不同的分析方法測(cè)定。

　　柱容量：≥1500ng

　　【試驗(yàn)原理】

　　玉米赤霉烯酮免疫親和柱基于抗原抗體特異性反應(yīng)，將玉米赤霉烯酮抗體偶聯(lián)與柱內(nèi)凝膠上，樣品提取液通過免疫親和柱時(shí)，提取液內(nèi)待測(cè)毒素(抗原)與抗體特異性結(jié)合，形成抗體抗原復(fù)合物保留在柱內(nèi)凝膠上，洗滌出去雜質(zhì)，用郵寄溶劑解離復(fù)合物，洗脫純凈待測(cè)毒素用于分析檢測(cè)。

　　【結(jié)果判定】

　　經(jīng)玉米赤霉烯酮免疫親和柱凈化后，收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計(jì)或者HPLC檢測(cè)，也可使用薄層色譜或者酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。收集到的1ml洗脫液中的玉米赤霉烯酮含量相當(dāng)于1g樣品中玉米赤霉烯酮含量。

　　玉米赤霉烯酮親和柱凈化過程

　　----3mL柱管取出上方堵頭，減去上堵頭螺紋下突出部分，插回柱子上(1mL柱管上方堵頭取出后斜 剪斷，然后再插回柱子上)，另一端與20mL針筒固定后使用;

　　----準(zhǔn)確移取上述混勻?yàn)V液，注入針筒中，調(diào)節(jié)針筒壓力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免疫親和柱;

　　----用20mL 水沖洗柱子，流速1秒/滴，棄去流出液，直至2~3mL空氣通過柱體，保證柱子內(nèi)沒有殘余 液體;

　　----準(zhǔn)確加入2mL甲醇(色譜級(jí))洗脫，流速自然重力，直至2~3mL空氣通過柱體，保證柱子內(nèi)沒有 殘余液體。收集全部洗脫液;

　　----過有機(jī)濾膜(孔徑0.22μm)后，進(jìn)行HPLC測(cè)定;或用氮?dú)獯蹈桑?jīng)流動(dòng)相復(fù)溶，過有機(jī)濾膜 (孔徑0.22μm)后，參照GB 5009.209-2016或GB/T 28716-2012條件進(jìn)行HPLC測(cè)定。

　　玉米赤霉烯酮親和柱凈化過程注意事項(xiàng)

　　1. 親和柱使用前，需要提前平衡30min至室溫;

　　2. 親和柱與20mL針筒連接時(shí)，一定旋緊20mL針筒與堵頭連接處，防止上樣過程漏液;

　　3. 采用大量程移液器準(zhǔn)確移取混勻?yàn)V液進(jìn)行上樣;樣液流過柱體的速度不能過快，采用固相萃取架過柱 時(shí)可以調(diào)節(jié)流速為2秒/滴，若無此設(shè)備，自然重力流速也可;

　　4. 沖洗柱子時(shí)保持自然重力流速即可;對(duì)于醬油、醋、油類、玉米加工副產(chǎn)物及飼料等顏色較深的樣品， 可以先用10mL 0.1%吐溫20-PBS清洗，再用10 mL 10%甲醇-水沖洗，后用10mL水沖洗柱子;

　　5. 柱子沖洗過后一定要用洗耳球吹干柱子內(nèi)殘余的液體，但不能讓柱子干燥時(shí)間過長(zhǎng)，要立即加入洗脫 液;

　　6. 采用玻璃移液管準(zhǔn)確移取2mL色譜級(jí)甲醇進(jìn)行洗脫，自然重力流速即可(不可施壓)，后一定要用 洗耳球吹干柱子內(nèi)殘余的甲醇，收集全部洗脫液;

　　7. 洗脫液必需先經(jīng)過0.22μm濾膜過濾才能進(jìn)行HPLC測(cè)定;

　　8. HPLC測(cè)定值接近zui高檢出值時(shí)，樣本實(shí)際含量可能大于柱容量而造成流穿，需減少上樣體積。