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肌糖原的酵解作用
點(diǎn)擊次數(shù):1402 發(fā)布時(shí)間:2009-11-16
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br />(1)學(xué)習(xí)檢定糖酵解作用的原理和方法。
(2)了解酵解作用在糖代謝過程中的地位及生理意義。
二、實(shí)驗(yàn)原理
在動(dòng)物、植物、微生物等許多生物機(jī)體內(nèi),糖的無氧分解幾乎都按*相同的過程進(jìn)行,本實(shí)驗(yàn)以動(dòng)物肌肉組織中肌糖元的酵解過程為例。肌糖元的酵解作用,即肌糖元在缺氧的條件下,經(jīng)過一系列的酶促反應(yīng)zui后轉(zhuǎn)變成乳酸的過程。肌肉組織中的肌糖元首先與磷酸化合而分解,經(jīng)過己糖磷酸脂、丙糖磷酸脂、丙酮酸等一系列中間產(chǎn)物,zui后生成乳酸。該過程可綜合在下列反應(yīng)式:
1/n(C6H5O5)n+H2O→2CH3CHOHCOOH
糖元 乳酸
肌糖元的酵解作用是糖類供給組織能量的一種方式。當(dāng)機(jī)體突然需要大量的能量,而又供氧不足(如劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)),則糖元的酵解作用暫時(shí)滿足能量消耗的需要。在有氧條件下,組織內(nèi)糖元的酵解作用受到抑制,而有氧氧化則為糖代謝的主要途徑。
糖元酵解作用的實(shí)驗(yàn),一般使用肌肉糜或肌肉提取液。在用肌肉糜時(shí),必須在無氧的條件下進(jìn)行;而肌肉提取液,則可在有氧條件下進(jìn)行。因?yàn)椋呋徒庾饔玫拿赶到y(tǒng)全部存在于肌肉提取液中,而催化呼吸作用(即三羧酸循環(huán))的酶系統(tǒng),則集中在線粒體中,糖元可用淀粉代替。
三、試劑與器材
試管、恒溫水浴、沸水浴、水浴、研缽、玻璃器皿等。0. 5%糖元溶液(或0.5%淀粉溶液)、液體石蠟、15%偏磷酸溶液、氫氧化鈣(粉末)、濃硫酸、飽和硫酸銅溶液。1/15 mol/L磷酸二氫鉀溶液(pH8.0)。1/15 mol/L磷酸二氫鉀溶液(pH7.4)、對(duì)羥基聯(lián)苯試劑;
四、操作方法處
死動(dòng)物→制備肌肉糜→肌肉的糖酵解→乳酸的測定
五、關(guān)鍵步驟與注意事項(xiàng)
① 動(dòng)物處死后,應(yīng)立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn),防止酶失活。
② 測定時(shí)所用的儀器應(yīng)嚴(yán)格洗滌干凈。