1、適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基
適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖zui培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基本物質(zhì)，還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖的生活環(huán)境。
2、血清
目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清.血清是細(xì)胞培養(yǎng)液zui其中一個(gè)重要成分是細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種生長(zhǎng)因子和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
3、無(wú)菌無(wú)毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境
無(wú)菌無(wú)毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外成功培養(yǎng)的首要條件.由于體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)微生物和有毒物質(zhì)缺乏防御能力，一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染或自身代謝物積累，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞中毒死亡.因此，在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，必須保持細(xì)胞生存環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒，及時(shí)清除細(xì)胞代謝物。
4、恒定細(xì)胞生長(zhǎng)溫度
為了保持培養(yǎng)細(xì)胞的旺盛生長(zhǎng)，必須有恒定和合適的溫度.不同種類(lèi)的細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)溫度有不同的要求.人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這個(gè)溫度范圍，會(huì)影響細(xì)胞的正常代謝，甚至死亡.培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)低溫的耐受性比高溫強(qiáng)，溫度上升不超過(guò)39℃時(shí),細(xì)胞代謝與溫度成正比；39-40個(gè)人體細(xì)胞℃1小時(shí)可能會(huì)受到一定程度的傷害，但仍有可能恢復(fù)；40-41℃細(xì)胞一般在1小時(shí)內(nèi)受損，只有少數(shù)可能恢復(fù)；41-42℃1小時(shí)內(nèi)，細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷，大部分細(xì)胞死亡，個(gè)別細(xì)胞仍有恢復(fù)的可能；當(dāng)溫度為43時(shí)℃所有細(xì)胞在上述1小時(shí)內(nèi)死亡.相反，溫度不低于0℃時(shí),雖然對(duì)細(xì)胞代謝有影響，但沒(méi)有傷害；將細(xì)胞放入25-35℃當(dāng)細(xì)胞仍能生存和生長(zhǎng)時(shí)，但速度減慢；4℃幾個(gè)小時(shí)后，回到37℃細(xì)胞可以繼續(xù)生長(zhǎng).隨著溫度的降低，細(xì)胞代謝減慢.當(dāng)溫度下降到冰點(diǎn)以下時(shí)，細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞結(jié)冰而死亡.但是，如果在培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護(hù)劑(二甲亞啶或甘油)，可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長(zhǎng)期保存。
5、適宜的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生存的必要條件之一，主要需要氧氣和二氧化碳。
6、適宜的環(huán)境濕度
7、適當(dāng)?shù)墓庹諚l件
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