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蛋白質(zhì)測(cè)定儀分析蛋白質(zhì)濃度高低
蛋白質(zhì)水解是組織蛋白酶B、D、H、L及氨膚酶作用的結(jié)果,研究表明肌肉組織蛋白酶B、H和L在干腌過程中表現(xiàn)出良好活性,在15個(gè)月的加工后還殘留5%一10%的活性,而組織蛋白酶D在第六個(gè)月的工藝過程中趨于消夫,鈣酶的作用由于其較差的穩(wěn)定性而限制在腌制初期的前二周。蛋白質(zhì)含量的測(cè)定可以使用蛋白質(zhì)測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定分析。
蛋白濃度的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法。考馬斯亮藍(lán)G一250在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488Inn;當(dāng)它一與蛋自質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋自質(zhì)一色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G一250結(jié)合在 2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下lh內(nèi)保持穩(wěn)定,而蛋白質(zhì)的變化可以直接使用全自動(dòng)定氮儀進(jìn)行快速的測(cè)定分析。O一100林g/mL標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:取6支 10mL干凈的具塞試管,按表2一2取樣。蓋塞后,將各試管中溶液縱向倒轉(zhuǎn)混合,放置 2min后用 1cm光經(jīng)的比色杯在 595nm波長(zhǎng)下比色,記錄各管測(cè)定的光密度 OD595nm,井做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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