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　　切片的*步必需粗切。粗切的厚度大約在５0～100微米左右，質(zhì)地較硬的組織或較小的組織應(yīng)再薄一些，粗切致組織全部暴露后，才進(jìn)行細(xì)切。細(xì)切至組織塊表面均勻一致，無白點(diǎn)后，再把切的蠟片放入溫水中。切片時要求用力均勻、柔和，搖速不易過快或過慢。過快會導(dǎo)致切片厚薄不均，機(jī)器磨損；過慢會使切片增厚。切片厚度一般3～5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。切下的片膜其大小形狀應(yīng)與組織塊一致，切片的不完整，常會將重要病變遺漏，導(dǎo)致誤診、漏診。在切片放蠟塊時，應(yīng)注意組織包埋的方向，組織的層次，纖維、肌肉等的走向應(yīng)與切片刀平行，較難切的部分應(yīng)放在上面，如皮膚的表皮，腫塊的包膜，胃腸道的漿膜等，這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。操作切片機(jī)時應(yīng)用力均勻，避免用力過重。對脫鈣組織、骨髓，以及已知的鈣化組織，應(yīng)選用固定的刀口，以減少其他部位出現(xiàn)缺口的可能性。在使用毛筆展片時要防止筆絲進(jìn)入刀口，因?yàn)槊壳械揭桓P絲，就會增加一個缺口。切片厚度一般為4～6微米，有人認(rèn)為：只要切片機(jī)刻度標(biāo)著幾個微米，切出來的片子就是幾個微米。其實(shí)不然，當(dāng)切片刀不鋒利，或切片時速度不勻，或切的較慢時，切的片子都會變厚，只有在切片機(jī)十分鋒利、切片勻速的情況下，才能真正保證其厚度。下面是切片時碰到的問題的原因及可能處理的方法：（1）組織發(fā)脆：一般是脫水、透明、浸蠟時間過長、溫度過高，并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)，在切片時，邊切邊用嘴向蠟片吹氣，可能會好些。（2）切片卷起，可能是刀不鋒利，或刀鋒在另一面，或刀角度過大，切片太厚等等。（3）蠟片彎曲：可能是刀鋒不均，切片刀未磨直，切片刀與蠟塊不平行。（4）
　　
　　透明、浸蠟時間過長、溫度過高，并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)（5）厚薄不均：可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊，組織太硬，或切片機(jī)主軸太向前，或切片機(jī)已磨損。（6）切片出現(xiàn)裂痕：可能是刀有缺口，石蠟內(nèi)有雜質(zhì)，組織內(nèi)有鈣化、骨片或有線結(jié),
　　
　　也可能會有棉紙纖維等。（7）切片不連片，切不下片，切片很厚，或者切片后蠟塊發(fā)白，內(nèi)陷：組織脫水不佳。補(bǔ)救辦法：可先將蠟塊溶解，取出組織，放入加熱水浴的丙酮內(nèi)（80℃），30～60分鐘，再進(jìn)行透明浸蠟包埋切片，也許會好一點(diǎn)。
　　
　　脫水和封片
　　
　　切片脫水應(yīng)從低濃度的酒精到高濃度的酒精，80%酒精1道，95%酒精2道，純酒精2道，（正丁醇1道），二甲苯2道。濃度低的酒精比濃度高的酒精更容易脫水，但也容易使伊紅退色，故脫水時間可短一點(diǎn)，每道3－5分鐘，純酒精每道10分鐘。為增加酒精與二甲苯的相融性，可在二甲苯前面增加一道正丁醇；石碳酸－二甲苯液也有此效，但用石碳酸時如不洗凈，可引起切片退色，不利于切片久存，故不作推薦。切片經(jīng)二甲苯透明后，用中性樹膠封固。為增加切片的透明度，防止細(xì)胞收縮、龜裂或切片出現(xiàn)黑色結(jié)晶樣小點(diǎn)。所以我們規(guī)定切片必須濕封，不得用溫箱烤干或電吹風(fēng)吹干后干燥封片。在南方冬春、霉雨季節(jié)，封片時要防止口鼻呼出的氣體接觸到切片；在天氣較潮濕的日子里，不宜一次將多張切片取出待封，以免切片“還潮”，形成透明不佳,出現(xiàn)云霧狀水珠。脫水劑的更換也應(yīng)有一定的時間規(guī)定。一般是每500ml液體，處理500張切片后更換一次為宜。封片樹膠不能過稀，封片時樹膠要均勻充滿蓋玻片且樹膠不及外溢為佳。要將組織全部覆蓋，也不能有氣泡。zui后，粘貼標(biāo)簽，標(biāo)簽必須貼于玻片左側(cè)，編號書寫清楚，能打印。