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       Foodjx導(dǎo)讀：潔凈車間滅菌方法有多種：紫外線滅菌、化學(xué)熏蒸、臭氧滅菌等；這里簡單介紹臭氧滅菌后對潔凈車間沉降菌的檢測":

A:操作方法：對潔凈車間用食品廠臭氧機(jī){車間臭氧機(jī)}滅菌1小時后進(jìn)行沉降菌檢測

 B:名稱：潔凈區(qū)微生物檢測操作規(guī)程

C:關(guān)鍵詞：潔凈區(qū)、食品廠臭氧機(jī)、車間臭氧機(jī)、微生物檢測

D:目 的：尋得食品廠臭氧機(jī)、車間臭氧機(jī)廠家 并規(guī)范潔凈區(qū)微生物檢測

E:原理：臭氧滅菌技術(shù)

F:適用范圍：100級、1萬、10萬、30萬級潔凈區(qū)環(huán)境。

1.         沉降菌檢測

1）        在萬級潔凈區(qū)內(nèi)的關(guān)鍵操作點和潔凈室內(nèi)每周檢測一次沉降菌和浮游菌；在10萬級潔凈區(qū)內(nèi)其檢測頻次為每月檢測一次。30萬級每季度檢測一次沉降菌。

2）        由微生物檢測員按《養(yǎng)基的配制操作規(guī)程的要求配制肉湯瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿使用Φ90mm×15mm，于121℃濕熱滅菌20分鐘，取出備用。

3）        做好潔凈區(qū)消毒工作，開啟潔凈區(qū)凈化空調(diào)系統(tǒng)，正常運(yùn)行不少于30分鐘；對單向流如100級的凈化工作臺和層流罩要在凈化系統(tǒng)運(yùn)行10min后開始。

4）        靜態(tài)測試在除測試人員外，室內(nèi)無生產(chǎn)人員的情況下進(jìn)行，動態(tài)測試在已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)下進(jìn)行。

5）        采樣點布置選用對角線法，要求布置地面四個方向，工作線上左右，關(guān)鍵設(shè)備頂上放置一個。

6）        萬級、10萬級、30萬級的少采樣點數(shù)可按下表確定。

在滿足少測點數(shù)的同時，還宜滿足少培養(yǎng)皿數(shù)，見下表

7）        百級區(qū)只有凈化工作臺下的局部范圍，其面積小于10m2，因此百級區(qū)取樣點至少為3個。

8）        測試人員按潔凈室級別規(guī)定的程序更換潔凈服進(jìn)入潔凈區(qū)；靜態(tài)測試時，室內(nèi)人員不得多于2人。

9）        將制備好的肉湯瓊脂培養(yǎng)基按采樣點布點位置離地0.8～1.5m處放置，打開培養(yǎng)皿蓋，暴露30分鐘，檢測人員及時填寫記錄，記錄房間溫濕度，壓差及測試狀態(tài)。

10）     蓋好皿蓋，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，在30～35℃中培養(yǎng)48小時，并用3只培養(yǎng)皿作對照。

11）     用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察平皿上所有菌落數(shù)，要注意菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，然后用5～10放大鏡檢查有否遺漏。

12）     計算平均菌落數(shù) =（M1＋M2……＋Mn）／n，式中 M1：1號培養(yǎng)皿菌落數(shù)，M2：2號培養(yǎng)皿菌落數(shù)，n： 培養(yǎng)皿數(shù)。

13）     用平均菌落數(shù)判斷潔凈室空氣中的微生物， 潔凈區(qū)的平均菌落數(shù)（靜態(tài)測試）：100級≤1個/皿，萬級≤3個／皿，10萬級≤10個／皿，30萬級≤15個／皿。

14）     如超過標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域重新消毒，重新采樣兩次，測試結(jié)果均須合格；否則要向質(zhì)量管理部通報，并采取相應(yīng)的措施。

15）     檢測人員必須向QA部門發(fā)“潔凈級別檢測記錄”，取樣和微生物培養(yǎng)及檢測人員均要在記錄上簽名，QA部門主管審核，記錄由質(zhì)量管理部保存三年。

2.         浮游菌檢測

1）        對萬級和10萬級潔凈區(qū)要進(jìn)行浮游菌的檢測，在萬級區(qū)內(nèi)的關(guān)鍵操作點和潔凈室內(nèi)每周檢測一次，10萬級潔凈區(qū)內(nèi)其檢測頻次為每月檢測一次。

2）        浮游菌取樣使用浮游菌采樣器，采樣器必須要有流量計和定時量，并按儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定，以保證測試數(shù)據(jù)的可靠性。

3）        采樣器進(jìn)入被測房間前要先用消毒劑滅菌，用于100級潔凈室的采樣器好是一直放在房間內(nèi)；采樣時使用規(guī)定為Φ150mm×15mm培養(yǎng)皿。

4）        由微生物檢測人員按《培養(yǎng)基的配制操作規(guī)程》的要求配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，于121℃濕熱滅菌20分鐘，取出備用。

5）        浮游菌取樣與沉降菌一樣可分為靜態(tài)測試和動態(tài)測試兩種狀態(tài)；各種潔凈度的采樣點數(shù)目和小采樣量如下表所示。

浮游菌取樣點數(shù)目及小采樣量

6）        采樣點布點位置離地0.8～1.5m處放置，送風(fēng)口測點位置離開送風(fēng)面30cm左右；可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍增加測點；采樣點的布置與5）相同。

7）        對單向流如l00級凈化工作臺，測試要在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于l0min后開始；對非單向流，如緩沖室、培養(yǎng)室，測試要在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開始。

8）        采樣者必須穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手要用消毒劑消毒；培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。

9）        采樣口及采樣管在使用前必須高溫滅菌，要用消毒劑消毒采樣器的頂盤，轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面；對采樣管的外壁和內(nèi)壁進(jìn)行消毒后，要將管中的殘留液倒掉并晾干。

10）     儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，先接通電源，啟動真空抽氣泵抽氣不少于5min，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)。

11）     調(diào)好流量，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速，已知采樣器的流量（L/min ），設(shè)定采樣時間（min），相乘即采樣量（L）；關(guān)閉真空泵。

12）     檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。

13）     對于單向流或逆風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對氣流方向，對于非單向流采樣管口向上，布置采樣點時，至少應(yīng)離開塵粒較集中的回風(fēng)口lm以上。

14）     除百級區(qū)外，在其他潔凈室采樣時，要在送風(fēng)口和關(guān)鍵部位各進(jìn)行一次采樣，每個采樣點只采樣一次。

15）     置采樣口于采樣點后，開啟采樣器，采樣時，測試人員要站在采樣口的下風(fēng)側(cè)，靜態(tài)測試時，室內(nèi)人員不得多于2人。

16）     采樣結(jié)束后取出培養(yǎng)皿，蓋上皿蓋并編號，注意防止采樣管對樣本的污染；要用消毒劑噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤，將采樣過程記錄在“潔凈級別檢測記錄”上。

17）     全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中30℃~35℃培養(yǎng)48h；每批培養(yǎng)基可選3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染。

18）     用肉眼直接計數(shù)，標(biāo)記或菌落計數(shù)器上點計，然后用500放大鏡檢查，有否遺漏，若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。

19）     浮游菌評定標(biāo)準(zhǔn)：100級≤5/m3，萬級≤100/m3，10萬級≤500/m3

20）     微生物檢測人在“潔凈級別檢測記錄”上記錄檢測數(shù)據(jù)，并交QA部門主管審批，每個測點的浮游菌平均濃度必須低于設(shè)定的潔凈度標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。

21）     若某測點的浮游菌平均濃度超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域先行消毒，然后重新取樣兩次，兩次測試結(jié)果必須合格；否則要向質(zhì)量管理部通報，并要采取相應(yīng)的措施。

車間凈化無菌級別請參照消毒標(biāo)準(zhǔn)。