HE4 EIA是酶聯(lián)免疫方法定量測(cè)定人血清中HE4含量的試劑盒。本測(cè)定試劑盒可用于輔助監(jiān)控對(duì)侵襲性上皮細(xì)胞型卵巢癌患者的治療情況。連續(xù)監(jiān)控患者HE4應(yīng)與其它臨床方法結(jié)合用于卵巢癌的監(jiān)測(cè)。
本測(cè)定試劑盒也可進(jìn)一步與ARCHITECT CA 125 II或CanAg CA125 EIA試劑盒(用于體外診斷)聯(lián)合使用
實(shí)驗(yàn)原理
HE4 EIA是一種非競(jìng)爭(zhēng)性的夾心酶聯(lián)免疫方法。它通過兩種小鼠單克隆抗體，即2H5和3D8，直接針對(duì)于HE4結(jié)構(gòu)域中C-WFDC的兩個(gè)抗原決定簇位點(diǎn)。操作時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品及患者標(biāo)本和*標(biāo)記的抗HE4鼠單克隆抗體（MAb）2H5滴加至鏈霉親和素包被的微孔板中一起溫育。在溫育過程中，標(biāo)準(zhǔn)品或患者標(biāo)本中存在的HE4抗原通過*標(biāo)記的抗HE4單克隆抗體（MAb）吸附到鏈霉親和素包被的微孔板上。隨后清洗微孔
板，加入HRP標(biāo)記的抗HE4單克隆抗體3D8進(jìn)行溫育反應(yīng)。經(jīng)過第二次清洗后，向每孔加入底物/顯色緩沖液（過氧化氫和3,3',5,5'四甲基聯(lián)苯胺）使其發(fā)生酶促反應(yīng)。在酶促反應(yīng)過程中如果抗原存在則會(huì)顯示為藍(lán)色。其顏色的深度與標(biāo)本中HE4的含量呈正比。微板孔中顏色的深度可用酶標(biāo)儀在620nm （也可選擇加入終止液后在405 nm ）進(jìn)行檢測(cè)。
每次試驗(yàn)后均需根據(jù)每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度與其相對(duì)應(yīng)的吸光度數(shù)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，患者標(biāo)本中的HE4濃度即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出。
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