一種新型的基于納米技術(shù)的生物
傳感器在高度準(zhǔn)確檢測(cè)沙門(mén)氏菌等食源性病原菌方面正顯示出巨大的潛力。
美國(guó)食品藥品管理局已經(jīng)發(fā)行了一本名為《有害病菌名錄》(BadBugBook)的手冊(cè)。該手冊(cè)提供了關(guān)于食源性致病微生物和天然毒素的基本情況,其中包含所有人們想了解的有關(guān)沙門(mén)氏菌、大腸埃希氏菌、原生寄生生物、蠕蟲(chóng)、病毒、天然毒素和其他有毒物質(zhì)的信息。當(dāng)你吃下的漢堡包中含有這些物質(zhì)時(shí),它們會(huì)使你生病難受,甚至?xí)媚阌谒赖?。疾病防控中心(CDC)持有的統(tǒng)計(jì)資料令人感到恐懼。據(jù)估計(jì),在美國(guó)食源性病原體每年會(huì)造成約7600萬(wàn)人發(fā)病,32.5萬(wàn)人住院,5000人死亡。
沙門(mén)氏菌、李氏桿菌和弓形蟲(chóng)這三種病原微生物每年會(huì)引起1500人死亡。沙門(mén)氏菌是造成食源性死亡zui常見(jiàn)的原因,每年會(huì)引發(fā)數(shù)百萬(wàn)例食源性疾病。沙門(mén)氏菌來(lái)源于生的或未煮熟的雞蛋、半生不熟的畜禽肉、奶制品、海產(chǎn)品、水果和蔬菜——幾乎包括我們所有的食物。因此,對(duì)食源性致病菌(特別是沙門(mén)氏菌)的早期檢測(cè)是進(jìn)行微生物學(xué)分析、保證食品安全的重要任務(wù)??茖W(xué)家已經(jīng)開(kāi)發(fā)了多種檢測(cè)該病原體的方法;然而,檢測(cè)速度和靈敏度仍然是zui大的挑戰(zhàn)。一種新型的基于納米技術(shù)的生物傳感器在高度準(zhǔn)確檢測(cè)食源性病原菌方面正顯示出巨大的潛力。
美國(guó)農(nóng)業(yè)部的農(nóng)業(yè)工程師博森·帕克(BosoonPark)表示:“對(duì)食源性致病菌的早期檢測(cè)是預(yù)防疾病爆發(fā)和保證公共衛(wèi)生安全的關(guān)鍵。目前的檢測(cè)技術(shù),例如ISO6579法、熒光抗體技術(shù)(FA)、酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)(ELISA)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等,不但耗時(shí)、繁瑣,而且靈敏度低?!迸量诉€是由喬治亞大學(xué)和韓國(guó)食品研究所的科學(xué)家組成的科學(xué)團(tuán)隊(duì)成員,該團(tuán)隊(duì)研究出了一種新型的檢測(cè)食源性細(xì)菌的有效方法。
喬治亞大學(xué)物理系副教授趙義平博士表示:“我們基于納米技術(shù)的生物傳感器在高靈敏度和高準(zhǔn)確性地檢測(cè)蛋白質(zhì)、病毒和細(xì)菌方面顯示了巨大的潛力。這種仿生異質(zhì)納米棒檢測(cè)方法在食品安全行業(yè)和生物醫(yī)學(xué)診斷方面具有巨大的潛力。”
該研究小組還包括喬治亞大學(xué)傳染病系的拉爾夫·特瑞普(RalphA.Tripp)博士。他們通過(guò)掠射角沉積技術(shù)(GLAD)制備薄膜法構(gòu)造了異質(zhì)結(jié)構(gòu)的硅/金納米棒陣列,并使用抗沙門(mén)氏菌抗體和有機(jī)染料分子使其功能化。由于硅納米棒高厚徑比大,附著在硅納米棒上的染料分子在捕獲和檢測(cè)沙門(mén)氏菌時(shí)能夠產(chǎn)生強(qiáng)熒光。
帕克認(rèn)為,傳統(tǒng)的用于檢測(cè)食源性病原體的微生物技術(shù)(如ISO6579法)通常需要5天時(shí)間才能獲得陽(yáng)性結(jié)果,其過(guò)程包括預(yù)培養(yǎng)、選擇培養(yǎng)和菌落鑒定,這些操作既耗時(shí)又費(fèi)力。傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的另一個(gè)缺點(diǎn)是對(duì)低污染水平的樣本靈敏度差。
很多研究人員已使用了熒光抗體技術(shù)(FA)檢測(cè)沙門(mén)氏菌。雖然熒光抗體技術(shù)能夠節(jié)約時(shí)間,但為了觀察到可檢測(cè)的熒光信號(hào),它要求樣本中要有足夠多的病原體。這常常意味著增菌培養(yǎng)技術(shù)要優(yōu)先于免疫熒光
顯微鏡技術(shù)。因此,熒光抗體技術(shù)尚未成為檢測(cè)沙門(mén)氏菌的常規(guī)方法。
納米技術(shù)在設(shè)計(jì)可靠檢測(cè)食源性病原體的傳感器方面正發(fā)揮越來(lái)越大的作用。趙義平教授說(shuō):“所有用于生物傳感的納米結(jié)構(gòu)都有兩個(gè)特點(diǎn)。首先,它們具有某些針對(duì)被分析物的識(shí)別機(jī)制,例如抗體或酶。其次,它們能夠從被分析物中產(chǎn)生特定的信號(hào),并且這種信號(hào)能夠由納米結(jié)構(gòu)自身產(chǎn)生或者由固定或包含在納米結(jié)構(gòu)中的信號(hào)分子產(chǎn)生?!?
傅俊學(xué)是趙義平教授研究小組的一名研究生,他指出,單組分納米結(jié)構(gòu)很難同時(shí)固定識(shí)別分子和信號(hào)分子。而異質(zhì)納米結(jié)構(gòu)則為解決這一問(wèn)題提供了良好的平臺(tái)。因此,不同功能的分子能夠被固定在異質(zhì)納米結(jié)構(gòu)的不同組分上,從而增強(qiáng)檢測(cè)的靈敏度和特異性。在實(shí)驗(yàn)中,趙義平教授成功地利用連接在金納米棒上的抗體捕獲了單個(gè)沙門(mén)氏菌,并被固定在硅納米棒上的大量染料分子檢測(cè)。
大體上,如果選擇合適的抗體與納米棒上的底物相連,則本項(xiàng)研究的結(jié)果能夠被用于檢測(cè)其他食源性致病菌,如大腸埃希氏菌、葡萄球菌,以及食物毒素。此外,熒光檢測(cè)染料還能夠被其他類型的染料或量子點(diǎn)替代,進(jìn)行多重檢測(cè)。
這種新型的納米生物傳感器可以被廣泛用于食品工業(yè)、食品安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)、政府食品安全監(jiān)管機(jī)構(gòu)和從事食品安全與生物安全的研究人員。