高效液相色譜儀的每周保養(yǎng)細(xì)節(jié)

一、泵系統(tǒng)保養(yǎng)

1. 流動(dòng)相管路與脫氣機(jī)檢查

• 管路清潔：用 10% 硝酸水溶液以 0.5mL/min 流速?zèng)_洗泵頭及管路 30 分鐘（去除金屬離子或鹽結(jié)晶殘留），再用超純水沖洗至中性，最后用甲醇 / 水（50:50）封存。

• 脫氣機(jī)維護(hù)：觀察脫氣管路是否有氣泡殘留，若脫氣效果下降，可更換脫氣機(jī)膜（根據(jù)使用頻率，通常每 3-6 個(gè)月更換一次）。

2. 泵頭與密封墊保養(yǎng)

• 泵頭沖洗：拆下泵頭入口單向閥，用異丙醇超聲清洗 15 分鐘（去除閥球與閥座的雜質(zhì)），安裝前用甲醇潤(rùn)洗；若使用緩沖鹽流動(dòng)相，需重點(diǎn)檢查泵頭內(nèi)是否有鹽結(jié)晶（可用棉簽蘸取超純水擦拭）。

• 密封墊檢查：觀察泵密封墊是否有磨損痕跡（如漏液或壓力波動(dòng)增大時(shí)需更換），更換后需用甲醇以 0.5mL/min 流速運(yùn)行 10 分鐘，確保密封良好。

二、進(jìn)樣系統(tǒng)保養(yǎng)

1. 手動(dòng)進(jìn)樣閥維護(hù)

• 轉(zhuǎn)子與定子清洗：拆下進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子，用乙醇棉球擦拭定子密封面（避免劃傷），檢查定量環(huán)是否有結(jié)晶或顆粒物（可用 10% 硝酸水溶液沖洗后再用超純水洗凈），安裝時(shí)涂抹少量潤(rùn)滑脂（如 Vacuubrand 真空脂），防止磨損。

2. 自動(dòng)進(jìn)樣器深度清潔

• 進(jìn)樣針與針座：用乙醇超聲清洗進(jìn)樣針（10 分鐘），去除殘留樣品；針座內(nèi)部用細(xì)針通入乙醇沖洗，再用壓縮空氣吹干，避免交叉污染。

• 樣品盤(pán)與洗針池：取出樣品盤(pán)，用肥皂水擦拭表面污漬，洗針池更換新鮮洗針液（如甲醇 / 水 = 3:1），并清理池底沉淀的雜質(zhì)。

三、色譜柱維護(hù)與性能驗(yàn)證

1. 色譜柱沖洗與封存

• 反相柱處理：若一周內(nèi)使用過(guò)緩沖鹽流動(dòng)相，需先用 10% 甲醇 / 水以 0.5mL/min 流速?zèng)_洗 60 分鐘，再用純甲醇沖洗 30 分鐘；長(zhǎng)期不用時(shí)，用純甲醇 / 乙腈（90:10）封存，兩端加堵頭并垂直存放。

• 正相柱處理：用正己烷以 0.5mL/min 流速?zèng)_洗 60 分鐘，去除殘留極性溶劑，防止固定相流失。

2. 柱效測(cè)試與記錄

• 用甲苯（反相柱）或萘（正相柱）標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行柱效測(cè)試：

• 測(cè)試條件：5μL 進(jìn)樣，流速 1.0mL/min，柱溫 30℃，UV 檢測(cè)波長(zhǎng) 254nm。

• 合格標(biāo)準(zhǔn)：理論塔板數(shù)（n）≥5000 / 米，對(duì)稱因子（T）在 0.95-1.05 之間，記錄測(cè)試圖譜與數(shù)據(jù)，對(duì)比歷史數(shù)據(jù)判斷柱效衰減情況。

四、檢測(cè)器保養(yǎng)

1. UV 檢測(cè)器維護(hù)

• 流通池清洗：拆下流通池，用 10% 硝酸水溶液以 0.1mL/min 流速?zèng)_洗 30 分鐘（去除蛋白或有機(jī)物沉積），再用超純水→甲醇依次沖洗，安裝后運(yùn)行基線，直至噪聲＜0.0005AU。

• 氘燈壽命監(jiān)控：查看工作站記錄的氘燈使用時(shí)間（通常壽命 2000 小時(shí)），若接近閾值需提前準(zhǔn)備更換，避免影響檢測(cè)靈敏度。

2. RID 檢測(cè)器維護(hù)

• 溫控系統(tǒng)檢查：用溫度計(jì)驗(yàn)證柱溫箱實(shí)際溫度與設(shè)定值的偏差（應(yīng)≤±0.1℃），若波動(dòng)較大，需校準(zhǔn)溫控模塊或檢查散熱風(fēng)扇是否正常。

• 流通池脫氣：運(yùn)行超純水以 0.5mL/min 流速?zèng)_洗流通池 30 分鐘，排除微小氣泡，避免基線波動(dòng)（RID 對(duì)氣泡敏感）。

五、系統(tǒng)性能驗(yàn)證與記錄

1. 壓力穩(wěn)定性測(cè)試

• 設(shè)定流速 1.0mL/min，運(yùn)行純甲醇 30 分鐘，記錄壓力波動(dòng)范圍：正常情況下壓力波動(dòng)應(yīng)＜10%，若波動(dòng)超過(guò) 20%，需排查泵單向閥、密封墊或管路是否漏氣。

2. 基線噪聲與漂移測(cè)試

• 運(yùn)行空白流動(dòng)相 1 小時(shí)，UV 檢測(cè)器在 254nm 處基線噪聲應(yīng)＜0.001AU，漂移＜0.01AU/h；若異常，需檢查流動(dòng)相純度、檢測(cè)器污染或電路干擾（如接地是否良好）。

3. 保養(yǎng)日志記錄

• 詳細(xì)記錄本周保養(yǎng)內(nèi)容，包括：

• 泵密封墊、進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子的更換時(shí)間；

• 色譜柱測(cè)試的柱效數(shù)據(jù)與圖譜編號(hào)；

• 檢測(cè)器流通池的清洗步驟與效果；

• 任何異常現(xiàn)象及處理措施（如壓力驟升時(shí)的沖洗方案）。

六、耗材與試劑管理

1. 耗材庫(kù)存檢查

• 清點(diǎn)濾膜（0.22μm/0.45μm）、注射器、進(jìn)樣針、泵密封墊等耗材的剩余量，按需補(bǔ)充，避免影響下周實(shí)驗(yàn)。

2. 流動(dòng)相試劑更換

• 更換過(guò)期或污染的流動(dòng)相（如超純水建議每周更換一次），緩沖鹽溶液需重新配制（超過(guò) 3 天易滋生微生物），有機(jī)相試劑檢查是否吸水變質(zhì)（如乙腈含水量＞0.5% 時(shí)需重蒸或更換）。

七、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境維護(hù)

• 清潔儀器表面及周邊區(qū)域，用無(wú)塵布蘸取乙醇擦拭儀器外殼，清除灰塵或溶劑殘留；檢查實(shí)驗(yàn)室溫濕度（溫度 20-25℃，濕度 40-60%），確?？照{(diào)與除濕機(jī)正常運(yùn)行，避免環(huán)境波動(dòng)影響儀器穩(wěn)定性。

總結(jié)

1. 泵與進(jìn)樣系統(tǒng)：防止鹽結(jié)晶和樣品殘留導(dǎo)致的硬件損傷；

2. 色譜柱：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化沖洗流程維持柱效，避免固定相流失；

3. 檢測(cè)器：確保流通池潔凈與溫控精度，維持檢測(cè)靈敏度。

使用高效液相色譜儀時(shí)需要注意的問(wèn)題是什么？